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    研域小貼士:一抗的挑選要點(diǎn)和技巧是什么?

    發(fā)布時(shí)間: 2020-05-12  點(diǎn)擊次數(shù): 1523次

    (1)單克隆和多克隆抗體的挑選:

    ?
    由一種克隆發(fā)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能方針明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就像dao彈地 射中方針一樣。另一方面,即使是同一個(gè)抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來(lái)發(fā)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng) 中,一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對(duì)小,檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可 以經(jīng)過(guò)關(guān)閉等防止)。


    (2)使用規(guī)模的挑選:


    有的一抗只能用于Western blotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;乃至標(biāo)明白臘切片或冰凍切片。


    (3)種屬反應(yīng)性的挑選:


    這一點(diǎn)很重要,標(biāo)明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體適合檢測(cè)哪種種屬動(dòng)物體內(nèi)的抗原。


    (4)種屬來(lái)歷:


    一般兔來(lái)歷的多是多克隆;而小鼠來(lái)歷的多是單克隆,但也有別的。根據(jù)此來(lái)歷來(lái)挑選相應(yīng)的二抗。


    (5)生產(chǎn)廠家的挑選:


    不同廠家的同一種抗體它的實(shí)際效價(jià),穩(wěn)定是不同的。
      

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