日韩av片免费播放-日韩av片无码一区二区不卡电影-日韩av无码国产精品-日韩av无码久久一区二区-日韩av无码免费播放-日韩av无码社区一区二区三区

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
一鍵分享網站到:
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體

    改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體

    發布時間: 2011-10-24  點擊次數: 3079次

    改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體

    HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯,在標記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后,再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。

    (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;
    (2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時溶液由原棕色變為墨綠色,置4℃放置30min,此時溶液由原棕色變為墨綠色;
    (3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應;
    (4) 加入待標記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 CBS,調節pH值至9.0;
    (5) 混勻,置4℃過夜改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
    (6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;
    (7) 對0.01mol/L,pH7.4 PBS,4℃透析過夜,換液3次;
    (8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;
    (9) 收集上清液即為酶標記抗體。

    【注意事項】
    (1) 在氧化HRP時,以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。
    (2) 一般認為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。
    (3) 氧化HRP時間以15-30min為宜。
    (4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。
    (5) 加入乙二醇的目的是終止反應;為便于在加入抗體后調pH值,故乙二醇要用0.05mol/L CBS配制。
    改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
     

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

全部免费毛片在线播放 | 囯产精品一品二区三区 | 97人妻精品一区二区三区 | 黄色a视频在线观看 | 丰满岳乱妇在线观看中字无码 | 欧美怡春院一区二区三区 | 国产麻豆精品精东影业av网站 | 91视频毛片 | 拍真实国产伦偷精品 | 国产欧美一区二区精品性色 | 欧美精品色婷婷五月综合 | 日本伊人精品一区二区三区 | 一本色道无码不卡在线观看 | 3d动漫精品啪啪一区二区下载 | 亚洲娇小与黑人巨大交 | 精品伊人久久久大香线蕉天堂 | 精品丝袜人妻久久久久久 | 色综合久久精品亚洲国产 | 国产亚洲精品精华液 | 亚洲精品一区久久久久久 | 亚洲成a人v欧美综合天堂 | 欧美成人在线视频 | 日本中国内射bbxx | 国产精品美女久久久 | 久久久久亚洲av无码专区桃色 | 波多野结衣美乳人妻hd电影欧美 | 精品国品一二三产品区别在线观看 | 国精品人妻无码一区免费视频电影 | 色婷婷综合和线在线 | 国产肥熟女视频一区二区三区 | 国模无码视频一区 | 国产激情艳情在线看视频 | 国内老熟妇对白hdxxxx | 午夜爽爽爽男女免费观看影院 | 91正在播放极品白嫩在线观看 | 国产苐1页影院草草影院 | www.av视频| 黄网站色视频免费看无下截 | 麻豆精品久久久久久久99蜜桃 | 少妇人妻系列1~100 | 99精品视频不卡在线观看免费 |