日韩av片免费播放-日韩av片无码一区二区不卡电影-日韩av无码国产精品-日韩av无码久久一区二区-日韩av无码免费播放-日韩av无码社区一区二区三区

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
一鍵分享網站到:
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體

    改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體

    發布時間: 2011-10-24  點擊次數: 3079次

    改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體

    HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯,在標記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后,再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。

    (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸鹽緩沖液1ml中,加入1%DNFB無水乙醇溶液0.1ml,室溫下輕微攪拌1h;
    (2) 加入新鮮配置的0.1mol/L NaIO4 0.5ml,此時溶液由原棕色變為墨綠色,置4℃放置30min,此時溶液由原棕色變為墨綠色;
    (3) 加入2.5%乙二醇1ml, 室溫下輕微攪拌1h,終止反應;
    (4) 加入待標記的抗體5-10mg, 用1.0mol/L, pH9.5 CBS,調節pH值至9.0;
    (5) 混勻,置4℃過夜改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
    (6) 加入硼氫化鈉溶液0.1ml,混勻,4℃放置3h;
    (7) 對0.01mol/L,pH7.4 PBS,4℃透析過夜,換液3次;
    (8) 3000r/min離心30min,去除沉淀物;
    (9) 收集上清液即為酶標記抗體。

    【注意事項】
    (1) 在氧化HRP時,以pH5.6醋酸鹽緩沖液溶解酶為宜。
    (2) 一般認為氧化HRP 5mg, NaIO4量以0.06mol/L 0.5ml為宜,不能低于0.015mol/L 0.5ml。
    (3) 氧化HRP時間以15-30min為宜。
    (4) 加入DNFB的目的是為了封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。
    (5) 加入乙二醇的目的是終止反應;為便于在加入抗體后調pH值,故乙二醇要用0.05mol/L CBS配制。
    改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
     

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

国产午夜鲁丝片av无码免费 | 国产国产人免费人成免费视频 | 91国在线 | 浪货趴办公桌~h揉秘书电影 | 国产高清av在线播放 | 和黑人邻居中文字幕在线 | 成人综合在线视频 | 国产免费一区二区三区免费视频 | 国产成人精品一区二三区 | 8090碰成年女人免费碰碰尤物 | 国产三级三级三级 | 亚洲成a人片在线观看www | 国产一区二区不卡视频 | 男女无遮挡xx00动态图120秒 | 性色欲网站人妻丰满中文久久不卡 | 中文无码一区二区不卡αv 乱子伦视频在线看 | 亚洲成亚洲乱码一二三四区软件 | 中文字幕+乱码+中文字幕无忧 | 欧美xxxx黑人又粗又长精品 | 无遮挡裸体免费视频尤物 | 精品国产一区二区三区无码 | 免费国产在线视频 | 又大又粗又爽18禁免费看 | 亚洲加勒比久久88色综合 | 无码人妻精品一区二区三区夜夜嗨 | 精品久久久久久无码中文野结衣 | 精品欧美日韩一区二区三区 | 精品国产午夜久久久久九九 | 国产良妇出轨视频在线观看 | 把女邻居弄到潮喷的性经历 | 国产中年熟女高潮大集合 | 亚洲人成电影在线播放 | 少妇中文字幕乱码亚洲影视 | 午夜性色福利在线视频福利 | 对白脏话肉麻粗话av | 私人毛片免费高清影视院 | 久久av无码精品人妻系列 | 亚洲国产精品无码久久久 | 一本一道久久综合狠狠老 | 免费人成无码大片在线观看 | 亚洲国产果冻传媒av在线观看 |