日韩av片免费播放-日韩av片无码一区二区不卡电影-日韩av无码国产精品-日韩av无码久久一区二区-日韩av无码免费播放-日韩av无码社区一区二区三区

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
一鍵分享網站到:
  • 資料下載DOWN

    您當前的位置:首頁 > 資料下載 > 豬胰腺干細胞分離鑒定

    豬胰腺干細胞分離鑒定

    發布時間: 2010/4/16  點擊次數: 1771次
    提 供 商: 研域(上海)化學試劑有限公司 資料大小:
    圖片類型: 下載次數: 0
    資料類型: 瀏覽次數: 1771
    相關產品:
    詳細介紹:

    糖尿病是性醫學難題,目前,對糖尿病的治療雖然有很多方法,但都不能從根本上解決問題。主要受制于供體不足和免疫排斥的問題。因此,人們寄希望于干細胞替代療法。干細胞增殖力強、數量充足、移植排斥反應相對較低,更重要的是胰腺干細胞可塑性強,可以分化形成胰腺組織的各種細胞。豬胰腺干細胞的研究,目的在于解決干細胞來源的問題. 本人在實驗室以往的工作基礎上,進一步分離、鑒定豬胰腺干細胞。無菌采集胎豬胰腺120例,采用酶消化法,用RPMI1640加入1mmol/L丙酮酸鈉,71.5μmol/Lβ-巰基乙醇,20ng/mL EGF、20ng/mL bFGF,100U/mL青霉素100U/mL、鏈霉素0.1mg/mL,添加10% FBS作培養基培養細胞。結果有59例僅獲得原代細胞,部分傳至6~8代后,細胞大量飄浮死亡。同時觀察到細胞傳至6~8代時,隨著細胞的大量死亡漂浮,皿底始終零散地保留一些圓形的、折光性強的小細胞。此時采用含20%血清的上述培養液后,皿中的小細胞在換液24h后形態發生變化,變大、變長,迅速擴增。48h后,每個小圓細胞形成一個克隆,96h后形成大的克隆,直徑超過100um,隨后細胞不斷從集落邊緣遷徙出來,細胞間相互連接,形成網絡狀生長,5~6天就會融匯成單層,此類細胞可以多次進行傳代。由此發現胰腺干細胞不能傳過7~8代的制約因素,成功地突破了胰腺干細胞擴增難題,并且一次獲得4株胰腺干細胞,其中一株已經順利傳至64代,另3例傳至10代,各代均有凍存;在誘導分化實驗中觀察到如果用無血清的培養基誘導胰腺干細胞向β細胞分化,細胞可以大量形成胰島細胞團,但是成團后細胞活力很快下降,發黑、漂浮甚至死亡。因此,進一步探索了誘導條件,采用含血清的誘導液誘導,不僅可以促使胰腺干細胞向胰島內分泌細胞分化,而且有效地避免了細胞分化后活力下降的問題。利用高糖刺激胰島素釋放實驗,胰島素和c-肽的分泌量分別可以達到306.87±20.72 mIU/mL和0.31±0.11ng/mL。 經免疫組化檢測,細胞表達目前*的胰腺干細胞特異性標記物,如胰腸同源域因子1、葡萄糖轉運子2、巢蛋白和波形蛋白,經RT-PCR檢測,細胞表達胰腸同源域因子1、葡萄糖轉運子2、胰淀素前體、胰島素、生長抑素,確定分離獲得的細胞為胰腺干細胞。細胞經成骨細胞誘導液誘導后,有明顯的細胞聚集成團塊狀物的形成,經茜素紅染色呈陽性;向神經細胞誘導后,細胞NF-200染色陽性;細胞亦表達胚胎干細胞的一些標志,如強表達胚胎干細胞的表面標志物OCT-4、胚胎階段特異性抗原(1Stage-specific embryonic antigens SSEA-1);用流式細胞儀證實細胞表達骨髓間充質干細胞的一些表面標志,如CD29,CD44,CD166。通過裸鼠致瘤性實驗證實所分離的胰腺干細胞無致瘤性。并制備了大鼠糖尿病模型,將誘導后的細胞經腹腔注射給大鼠模型用于治療,僅在注射后的2~4天內,血糖略有下降。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

欧美性受xxxx狂喷水 | 91精品国产免费网站 | 白丝爆浆18禁一区二区三区 | 色综合久久一区二区三区 | 国产精品久久无码一区 | 国产精品va免费视频 | 精品无码国产一区二区三区51安 | 亚洲av成人一区二区三区 | 欧美黑寡妇特a级做爰 | 国产欧美精品aaaaaa片 | 久久久久久亚洲精品不卡 | 插插射啊爱视频日a级 | 999国内精品永久免费视频 | 国产精品永久免费视频 | 色与欲影视天天看综合网 | 国产性夜夜春夜夜爽1a片 | 国产av无码专区亚洲av果冻传媒 | 国产午夜毛片一区二区三区 | 99久久精品免费看国产 | 人妻丝袜无码国产一区 | 亚洲线精品一区二区三区 | 日韩精品无码一区二区三区四区 | 57pao成人国产永久免费视频 | 狠狠色噜噜狠狠狠777米奇小说 | 中文字幕亚洲欧美日韩在线不卡 | 无码精品人妻一区二区三区漫画 | 少妇高潮流白浆在线观看 | 无码一区二区三区中文字幕 | 中文亚洲av片不卡在线观看 | 一本一道久久a久久精品综合 | 熟女少妇精品一区二区 | 日韩精品无码中文字幕一区二区 | 极品人妻被黑人中出种子 | 精品无码一区二区三区亚洲桃色 | 国产一区二区三区不卡在线观看 | 亚洲日韩精品a∨片无码 | 国产精品jizz在线观看无码 | 亚洲日韩精品欧美一区二区 | 国产a一级毛片含羞草传媒 国产a一级毛片爽爽影院 | 久久天天躁狠狠躁夜夜躁2014 | 亚洲人成伊人成综合网久久久 |