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    容易讓ELISA試劑盒變質的因素

    發布時間: 2018-01-04  點擊次數: 1147次

    ELISA試劑盒為什么會蛻變呢?是什么影響了ELISA試劑盒質保?一旦蛻變會有什么影響呢?
    1.辦法學的影響   
    ELISA測定形式包含以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競賽抑制法,其中競賽抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競賽等要素的影響,成果重復性較差,質量較難操控。
    2.試劑要素
    不同批次的ELISA試劑在制造進程中很難確保質量*一致,即使是經過批批檢的項目其檢測成果也存在差異,因而有必要挑選和訂貨長批號的試劑,并確保保存條件。嚴格執行這一規范可以防止因試劑批號改動而從頭樹立質控系統及從頭評價試劑的雜亂進程,而且可以確保成果的穩定性;關于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,防止重復凍融形成試劑的失效。
    3.ELISA試劑盒樣本要素
    標本干擾要素包含內源性干擾要素和外源性干擾要素,前者包含類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包含標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存時刻過長、標本凝結不全、冷凍標本的重復凍融等。
    4.操作要素
    ELISA操作進程雜亂,操作不妥將引起較大的差錯。加樣、溫育、洗刷、顯色、比色。
    5.灰區的設置
    通常情況下,ELISA定性試驗以“陽性”和“陰性”來報告成果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判別值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定成果報告的根據。
    6.標本復查
    ELISA手藝檢測進程雜亂,影響要素較多,即使室內質控在控,也可能因孔間差異而形成成果的差異,因而加大復查力度是確保成果準確性的牢靠辦法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及罕見形式的檢測成果進行復查。
    7.ELISA試劑盒常表明成果的常用辦法
    a.定性測定
    b.半定量測定 成果一般以滴度表明。
    c.定量測定 即用已知量的規范品作一系列稀釋后進行ELISA測定,制作規范曲線,成果以量或單位表明。在ELISA定量檢測中每一塊反響板都有必要制作相應的規范曲線。

     

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